Nous avons identifié une nouvelle forme du Ku70, la protéine essentielle du système de réparation des cassures double-brin de l'ADN (CDB) par les jonctions terminales non-homologues (NHEJ). Cette protéine est constitutivement surexprimée dans les cellules leucémiques (LLC) résistantes à l'apoptose radio-induite et elle est inductible par irradiation/drogues in vitro (méthodologies employées étant les immunopurifications, l'électrophorèse bidimensionnelle et la spectrométrie de masse; ces mêmes méthodologies sont susceptibles être appliquées aussi pour ce projet). Les cellules leucémiques résistantes ont par ailleurs une activité NHEJ plus élevée avec activité de liaison à l'ADN de l'hétérodimère Ku70/Ku80 plus élevée. Le projet vise la détermination moléculaire du rôle de cette nouvelle forme de Ku70 dans la réponse cellulaire au stress d'irradiation (faible et forte dose d'irradiation) ainsi qu'à son implication dans l'acquisition du phénotype résistant des cellules LLC. Les lignées cellulaires B (EBV- ayant la p53wt et mutée, telles que BL2 et Ramos) permettant les études de mutagenèse et les invalidations d'expression par approche shRNA a été déjà développé en collaboration avec D. Biard, Inserm/CEA. Les anticorps monoclonaux (système hybridome) spécifiques de la forme phosphorylée fonctionnent très bien en WB, immunoprécipitation et immunofluorescence. Ainsi, les outils pour développer le sujet proposé sont déjà mis en place au laboratoire.